采用酶底物法對地表水水樣進行不同倍數的稀釋后進行培養檢測,觀察地表水結果變化。結果表明:地表水水樣稀釋倍數越小,結果越準確。采用酶底物法測定地表水中的糞大腸菌群具有快速、簡便的特點,準確掌握水樣稀釋倍數對測定結果就越準確。
加入含有總大腸菌群細菌的水樣,放入程控定量封口機中,目標細菌在MinimalMediumONPG-MUG培養基中36℃培養,總大腸菌群細菌產生的特異性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培養基中的色源底物ONPG,使培養呈現黃色;同時水樣中大腸埃希氏菌產生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG培養基中的熒光底物MUG,產生特征性熒光。
同樣原理,耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5℃培養時會分解MinimalMediumONPG-MUG培養基中的色源底物ONPG,使培養基呈現黃色。9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口機配合51孔定量盤或97孔定量盤提供簡單、快速、準確的定量檢測總大腸菌群、大腸埃希氏菌、糞(耐熱)大腸菌群、腸球菌和綠膿假單胞菌的實驗方案。51孔定量盤和97孔定量盤是基于傳統方法最大可能數(MPN)統計模型而設計的半自動定量方法。程控定量封口機自動將樣品/試劑混合液分配到獨立孔中。培養結束后,陽性孔數可以轉化為MPN值。51孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-200MPN值。97孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-2,419MPN值。整個檢測過程手工操作時間小于1分鐘。
【使用方法】
定性測試:
第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解,36℃培養24h;
第二步、結果判讀
無色=陰性
黃色=總大腸菌群陽性
黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽性
注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養24h后,觀察黃色為陽性
第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解;
第二步、倒入51孔定量檢測盤(定量孔板)或97孔定量檢測盤(定量孔板)中;
第三步、用程控定量封口機對定量檢測盤(定量孔板)進行封裝,36℃培養24h;
第四步、51孔定量檢測盤(定量孔板)結果判讀:
無色=陰性
黃色格子=總大腸菌群陽性
黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽性
查對照MPN表計數
注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養24h后,觀察黃色格子為陽性結果,查對照MPN表計數。