采用酶底物法對(duì)地表水水樣進(jìn)行不同倍數(shù)的稀釋后進(jìn)行培養(yǎng)檢測(cè),觀察地表水結(jié)果變化。結(jié)果表明:地表水水樣稀釋倍數(shù)越小,結(jié)果越準(zhǔn)確。采用酶底物法測(cè)定地表水中的糞大腸菌群具有快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn),準(zhǔn)確掌握水樣稀釋倍數(shù)對(duì)測(cè)定結(jié)果就越準(zhǔn)確。
加入含有總大腸菌群細(xì)菌的水樣,放入程控定量封口機(jī)中,目標(biāo)細(xì)菌在Minimal
MediumONPG-MUG培養(yǎng)基中36℃培養(yǎng),總大腸菌群細(xì)菌產(chǎn)生的特異性生物酶β
一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)呈現(xiàn)黃色;
同時(shí)水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG
培養(yǎng)基中的熒光底物MUG,產(chǎn)生特征性熒光。同樣原理,耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5
℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG
,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。
9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口機(jī)配合51孔定量盤或97
孔定量盤提供簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的定量檢測(cè)總
大腸菌群、大腸埃希氏菌、糞(耐熱)大腸菌群、腸球菌和綠膿假單胞菌的實(shí)驗(yàn)方案。51孔定量盤和97孔定量盤是基于傳統(tǒng)方法最大可能數(shù)(MPN)
統(tǒng)計(jì)模型而設(shè)計(jì)的半自動(dòng)定量方法。
程控定量封口機(jī)自動(dòng)將樣品/試劑混合液分配到獨(dú)立孔中。
培養(yǎng)結(jié)束后,陽(yáng)性孔數(shù)可以轉(zhuǎn)化為MPN值。
51孔定量盤可檢測(cè)每100mL水樣中1-200MPN值。
97孔定量盤可檢測(cè)每100mL水樣中1-2,419MPN值。
整個(gè)檢測(cè)過(guò)程手工操作時(shí)間小于1分鐘。
【使用方法】
定性測(cè)試:
第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解,36℃培養(yǎng)24h;
第二步、結(jié)果判讀
無(wú)色=陰性
黃色=總大腸菌群陽(yáng)性
黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性
注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養(yǎng)24h后,觀察黃色為陽(yáng)性
定量檢測(cè)
第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解;
第二步、倒入51孔定量檢測(cè)盤(定量孔板)或97孔定量檢測(cè)盤(定量孔板)中;
第三步、用程控定量封口機(jī)對(duì)定量檢測(cè)盤(定量孔板)進(jìn)行封裝,36℃培養(yǎng)24h;
第四步、51孔定量檢測(cè)盤(定量孔板)結(jié)果判讀:
無(wú)色=陰性
黃色格子=總大腸菌群陽(yáng)性
黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽(yáng)性
查對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)
注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養(yǎng)24h后,觀察黃色格子為陽(yáng)性結(jié)果,查對(duì)照MPN表計(jì)數(shù)。